荧光标记服务


除目录产品和抗体荧光标记服务外,凯普瑞生物还可根据客户的多色流式细胞仪的特定需求,提供多色试剂配色服务。

拥有化学家和免疫学家的凯普瑞专业科研团队将全方位了解客户需求和规格,竭诚与客户合作,并对组合中的多色试剂进行多次优化和测试,最终在cGMP管理规范下生产制造出高性价比的多色试剂盒。

CONJUGATION STAIN INDEX
mFluor™450 24
FITC 56
iFluor™ 488 81
PE 360
PerCP 25
PerCP-Cy5.5 162
PE-Cy5 482
PE-Cy7 215
APC 350
iFluor™ 647 119
iFluor™ 700 61
APC-Cy7 65
APC-iFluor™ 700 183

表1:在CytoFLEX仪器上用新鲜血液染色法检测Caprico CD3试剂(克隆号UCHT1)SI值。利用CD3阳性细胞群和阴性淋巴细胞群比计算SI值

LASER CAPRICO FLUOROCHROMES EX,nm Em,nm ALTERNATIVE FLUOROCHROMES
Violet (405nm) mFluor™450 404 454 V450, Pacific Blue
mFluor™500 410 501 V500, Krome Green
mFluor™540 415 537 V500, Krome Orange
Blue 488nm) FITC 494 519  
iFluor™488 494 518 Alexa Fluor®488, Dylight™488
PE 496 578  
PerCP 482 675  
PerCP-Cyanine5.5 496 695 PC5.5, PerCP-Cy5.5
PE-Cyanine5 496 670 PE-Cy5
PE-Cyanine7 496 785 PC7, PE-Cy7
Green(562nm) PE 496 578  
iFluor™ 594 588 604 Texas Red™
PE-CF594 496 604 PE-eFlour®610, ECD
PE-Cyanine5 496 670 PE-Cy5
PE-Cyanine7 496 785 PC7, PE-Cy7
Red (633nm) APC 650 660 APC
iFluor™647 649 664 Alexa Fluor®647
APC-iFluor™ 700 652 714 APC-R700, APC-Alexa 700, APCA700
iFluor™700 685 714 Alexa Fluor®700
APC-Cyanine7 650 780 APC-Cy7

表2: Caprico Biotechnologies提供的荧光染料的光谱特征

图片名称

荧光染料 Fluorophores

流式细胞术中,根据仪器设置、荧光染料特征以及特定通道(例如,四色,六色或十色)中所需的标记,人们会选择使用不同类型的荧光染料。

 

荧光试剂如FITC、PE、APC和PerCP已成为多年来广泛应用的标准荧光染料。串联染料,通常是由较大荧光染料和小荧光染料共价耦连,其不但可以提高特定检测设备的利用率—为每个激光器增加更多选择的检测通道,还能让一些有价值的(有时是非常有限的)样品产生更多的生物信息。

 

许多荧光基团在流式细胞仪中拥有潜在的应用价值。新一代小分子荧光染料,如Alexa Fluor, iFluor和mFluor,正在迅速取代许多传统荧光染料,为用户提供更高的光稳定性和更亮的荧光信号。我们公司提供包括iFluor™和mFluor™系列的高性能荧光染料试剂。

iFluor™荧光染料 iFluor™ Fluorophores

mFluor™荧光染料 mFluor™ Fluorophores

iFluor™荧光染料针对荧光强度,光稳定性和pH敏感度等方面进行了优化,其发射光谱跨越整个紫外可视的光谱范围。其中iFluor™488与 AlexaFluor®488的光谱曲线特性相同。但iFluor™488采用了高纯度的单罗丹明异构体制备,显著提高了标记产物间一致性,减少了批间变异率。而iFluor™ 647与AlexaFluor® 647和DyLight™650也具有几乎完全相同的激发和发射光谱特性。

mFluor™荧光染料是专为流式细胞仪应用而开发,可实现多色检测。这些染料可显示出较大的荧光波长位移和良好的水溶性。 mFluor™荧光染料系列的发射光谱可跨越整个紫外可视光谱范围,其设计理念是,在流式细胞仪上,488nm的蓝色激光器或405nm的紫色激光器,均可对其进行很好的激发。由于藻蛋白的串联染料很难与抗体或其他生物分子藕连,mFluor™荧光染料是藻蛋白的串联染料的极好替代品。

凯普瑞生物

凯普瑞生物专注于生产科学研究及临床应用方面的流式试剂。公司凭借在其生物标记方面的专业知识,凯普瑞的科学家们还使用20多种不同类型的标记物提供抗体标记服务,标记物包括:FITC, PE, PerCP, APC, PerCP-Cy5.5, PE-Cy5, PE-Cy7, APC-Cy7, Biotin, HRP, AP, mFluor450, mFluor540, iFluor488, iFluor594, iFluor647, iFluor680, iFluor700, iFluor790, PE-iFluor594, PE-CF594和 APC-iFluor 700。

光稳定性强 Superior Photostability

串联荧光染料暴露在灯光下容易受光降解,导致发射光谱重叠增加,从而需要增加分析补偿。

 

凯普瑞的APC-iFluor™700试剂显示出更强的光稳定性。

 

当串联试剂在室温下曝光时,补偿值和荧光强度都会随时间而产生变化。在曝光20小时后,与APC-AlexaFluor® 700试剂的补偿值变化(从9.39%到121.25% )相比,APC-iFluor™700试剂显示出更少的补偿值变化(从8.43%到20.63% )。此外,在曝光20小时后, APC-AlexaFluor® 700试剂仅剩下39%的SI初始值,相比之下,APC-iFluor™700试剂保持了84%的SI初始值。

Light exposure APC-iFluor™700 Compensation FL4[A]-FL3[A](APC) APC-AlexaFluor® 700 Compensation FL4 [A]-FL3 [A] (APC)
No exposure 8.34% 9.39%
30 min 8.85% 10.99%
2h 9.58% 15.70%
4h 10.63% 21.82%
6h 12.55% 37.28%
20h 20.63% 121.25%
图片名称

将CD3 APC-iFluor700和CD3 APC-AlexaFluor 700试剂在室内曝光20h。用曝光后的试利和CD4 APC分别对PBMC地行染色。在Beckman Coulter CytoFLEX流式细胞仪上进行检测分析。